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海洋丝状真菌基因组编辑系统的建立与优化

海洋真菌，基因编辑，次级代谢，CRIPSR/Cas9，多基因编辑

海洋来源的丝状真菌因产生多种结构类型与优良生物活性的次级代谢产物而引起微生物学家和药学家的广泛关注。然而，由于大量的次级代谢基因在常规的实验室培养中低表达或沉默，使得传统天然产物研究方法发现新化合物的几率越来越小。基因组编辑是激活真菌沉默次级代谢产物的强有力策略，已被广泛应用于丝状真菌新颖次级代谢产物的发现研究。然而，目前基因组编辑技术仅在少数几个模式真菌中成熟应用，在绝大多数海洋来源真菌中使用极少。本课题组在一株海兔附生土曲霉RA2905中建立了基于CRIPSR/Cas9的基因组编辑系统，进而通过对编辑质粒进行改造和优化，拓展到深海来源真菌微紫青霉P0301等其它海洋真菌。并且，基于自主复制型质粒pAMA1-Cas9-Marker，在海洋真菌中实现了可重复、多个基因同时进行的编辑。接下来，我们将运用这套基因组编辑系统靶向激活沉默次级代谢基因簇，提升重要代谢产物的产量水平，及阐明新颖次级代谢产物的生物合成机制。